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NEWS小C讲堂:不朽情缘MG如何降低污染风险保护细胞培养物
来源:伊莲堂 日期:2025-03-08实验室及细胞培养的污染是生物医疗研究、开发和生产过程中面临的重大风险。污染不仅会影响细胞培养和实验结果的准确性,甚至可能导致珍贵实验资源的浪费。在生物制造领域,这一问题尤为重要,因为污染是导致批次不合格的主要因素之一。然而,污染问题的普遍性让人担忧,污染源可能来自多种因素,包括人为失误、交叉污染、不当的实验室操作以及受污染的原材料。同时,许多污染在早期难以被检测到,这使得在发现问题之前,污染可能已经扩散到大量培养物中。因此,保护珍贵的细胞培养物成为了一项极其艰巨的任务。但别担心,今天我们将一起探讨关于污染的问题及其风险降低的对策,特别是针对不朽情缘MG的应用。
支原体污染是细胞培养项目中的一个关键因素,能显著影响细胞的行为、形态和功能。期刊审稿过程中,可能会要求提供支原体检测结果的相关数据(例如,检测标准、数据可用性及实验方案)。所幸,我们可以通过简单的DNA荧光染色法和基于PCR的支原体检测方法来识别污染。相关检测可以在实验室内轻松完成,或者将样本送至外部实验室进行检测。
通风柜和培养箱常常被多个研究团队共享,因此极易成为污染源。定期的维护和清洁显得至关重要。建议每月使用消毒剂和70%乙醇对培养箱进行清洁,架子应进行高压蒸汽灭菌。水盘也要定期清洁,确保不会有污染源。而通风柜内部空间理应每日用70%乙醇清洁,每月用10%漂白剂或等效产品清洁一次,确保实验室环境的卫生和安全。
细胞系和原材料供应商必须在放行前对此类产品进行严格的检测,并提供相应的文件,列出检测结果和无菌水平。需要注意的是,无菌保证水平(SAL)可能因生产商或产品而异。譬如,SAL10-3表示在1000件产品中,可能存在一次微生物污染的几率为1。如果细胞或分析产品非常敏感,可以考虑使用过滤灭菌的培养基,避免出现潜在的污染问题。
抗生素广泛应用于防止细胞培养中的细菌污染,但已有研究显示抗生素可能导致细胞基因的表达和调控发生变异。因此,在使用抗生素时,必须了解并评估其对特定细胞培养物的影响。在药物研发时,更须对抗生素的使用进行仔细评估。通过转录组测序(RNA-Seq)和染色质免疫沉淀测序(ChIP-Seq)等技术,可以初步检测抗生素对细胞基因表达的影响。
实验室中,资源和时间的支配对结果的可信度存在直接影响。挽救实验结果虽可行,但时间与资源必定是要耗费的。比较而言,重新启动实验可能需要一周甚至更长,但最终得到的可靠数据更可能适用于发表。因此,根据实际情况评估是否进行细胞挽救显得尤为重要。
在发生污染时,应对培养箱、水浴箱、通风柜及其他工作表面进行全面清理,同时更换所有可能受污染的培养基或试剂。尽管我们可能找不到确切的污染源,但在后续几周内,密切监测培养物变化,并确保实验室人员遵守操作规程,将有助于降低进一步污染风险。
交叉污染是由于不同细胞系意外混合而导致的,主要源于共用培养基与设备等多种原因。因此,在实验室的工作中,细胞鉴定尤为重要,隔离并检测新进入的所有培养物。此外,清洁通风柜、做到原则性使用单一细胞系,都是防范污染的重要步骤。对于保存在气相液氮中的冻存细胞,更是必要的策略之一。
通过遵循上述措施并融合不朽情缘MG的专业技术,能有效降低细胞培养中的污染风险,从而确保实验的成功和可靠性。
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