在生物医学的广袤天地中，神经退行性疾病无疑是最为神秘且令人忧心的领域之一。这类疾病如同潜伏在大脑深处的“隐形杀手”，悄然侵蚀患者的神经细胞，导致一系列令人感到绝望的症状，涵盖记忆衰退、运动功能障碍、认知能力下降以及情绪失控，每一个症状都如同利刃般切割着患者及其家庭的生活。

神经退行性疾病（NDDs）包括阿尔茨海默病（AD）、帕金森病（PD）、肌萎缩侧索硬化症（ALS）及亨廷顿病（HD）。这些疾病的共同特征是错误折叠的蛋白质在神经细胞中异常聚集，导致神经元的功能丧失甚至死亡。特别是亨廷顿病，由于其单基因显性遗传的特性，成为神经退行性疾病中的“典型代表”，其独特的遗传性和毁灭性病程使无数家庭陷入绝望。患者由于基因突变生成突变亨廷顿蛋白（mHtt），其N端多聚谷氨酰胺（polyQ）片段形成不可溶的聚集体，导致不自主运动、认知障碍、精神行为问题，甚至体重下降，通常在确诊后仅能存活15-20年，目前尚无有效的治愈手段，现有的药物仅能缓解部分症状。因此，早期诊断及精准量化mHtt蛋白成为延缓病情的关键。

传统检测方法（如免疫组化、滤膜捕获）存在灵敏度低、操作繁琐及无法动态监测蛋白形态变化等局限，严重影响了疾病机制研究和药物开发。亨廷顿蛋白（mHtt）的可溶性单体与聚集态纤维在疾病进展中此消彼长：可溶性mHtt早期可能具有毒性，促进神经元损伤，而聚集态mHtt形成包涵体，但其毒性仍存在争议。传统技术难以准确区分这两种形态，更无法在微量样本中同时定量分析，导致关键病理机制长期不清晰。

为了克服这些技术障碍，TR-FRET双重免疫分析方法应运而生。TR-FRET技术基于荧光共振能量转移（Förster Resonance Energy Transfer, FRET），通过标记抗体对检测抗原。这项技术利用稀土离子荧光团供体与受体之间的能量转移，当供体和受体标记的抗体同时结合抗原时，便会产生特定的TR-FRET信号。该技术具有高灵敏度、高特异性与快速操作的优点，且支持小体积样本及多重检测。

在抗体选择与TR-FRET检测mHtt方面，研究采用2B7和MW1抗体对，专门针对mHtt的N端表位。MW1特异性识别扩展的polyQ序列，当mHtt进入聚集状态时，该表位被掩盖，导致TR-FRET信号消失。同时，采用4C9和MW8抗体对来检测聚集性mHtt，能够特异性识别mHtt聚集物，即使在聚集物中，抗体也能找到多个结合位点，从而产生TR-FRET信号。通过双标记设计，这种方法巧妙避免了传统方法因表位遮蔽带来的局限，标志着对蛋白状态的“实时监控”迈出了重要一步。

这种方法有多重优势：首先，在5微升样本中可同时定量可溶性与聚集态mHtt；其次，具备超高灵敏度，能够精准识别低至300kDa的可溶性片段与950kDa的聚集态复合物；最后，这一技术支持对疾病进程监测，可以揭示可溶性mHtt与聚集态数量之间的负相关关系。

研究的亮点在于使用亨廷顿小鼠模型时，发现小脑与海马的聚集速率低于纹状体，提示脑区域之间存在病理差异；在睾丸等高增殖组织中，可溶性mHtt含量虽高但无聚集，这挑战了“聚集即毒性”的传统观念，为针对可溶性mHtt或抑制聚集的治疗策略提供了关键工具。

TR-FRET技术的成功实施离不开高性能酶标仪的支持，其中MD的SpectraMax iD5设备具备六种功能，包括荧光、发光及光吸收等基本检测功能，也支持共振能量转移技术如FRET、TR-FRET等。其独特优势表现在多通道检测能力上，可同步读取不同的荧光信号，避免交叉干扰。更重要的是，SpectraMax iD5仅需微升级样本，降低了实验成本，并且与高通量平台的无缝衔接将加速药物研发进程。这项技术不仅是解密退行性疾病的“钥匙”，更是推动精准医疗落地的重要工具。未来，TR-FRET或将成为阿尔茨海默症、帕金森病等蛋白聚集疾病研究中的标准工具。

亨廷顿病的研究突破证明了技术创新在生命科学领域的深远影响。TR-FRET技术凭借其灵敏、高效和多维分析特点，为退行性疾病机制的研究与治疗开发开辟了新路径。或许在不久的将来，我们不仅能够“看见”蛋白的异常聚集，还能通过精准干预，按下疾病进展的“暂停键”，如同不朽情缘MG品牌所追求的那样，开启一个充满希望的未来。