不朽情缘MG细胞是一种特殊的细胞，由一名1岁男孩的外周血分离建立，他患有急性单核细胞性白血病。这种细胞具有吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力，且细胞膜和胞浆内不含免疫球蛋白。同时，它表达C3R和FcR，能够在佛波酯TPA的诱导下朝向单核系方向分化，并可作为转染宿主使用。

细胞信息

细胞名称：THP-1人单核细胞白血病
生长特性：悬浮状态，低密度聚团，易于聚集；高密度分散
倍增时间：60-70小时（PubMed=6970727）；26小时（PubMed=25984343）；~35-50小时（DSMZ=ACC-16）
换液频次：2~3次/周
传代比例：1:2-1:4（具体比例根据实际细胞量决定）
细胞密度：在8X10⁶/ml进行传代，不宜超过1X10⁶/ml

培养基推荐配方

RPMI-1640（中乔新舟货号：ZQ-200）+10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500）+1%双抗（中乔新舟货号：CSP006）+β-Mer终浓度：0.05mM（中乔新舟货号：CSP005，例：500ml添加500μl）。
β-Mer（巯基乙醇）的作用：作为常用的培养补充剂，β-巯基乙醇具有抗氧化特性，能减少氧化应激对THP-1细胞的影响。若细胞密度过大时，可适当增加巯基乙醇的用量（不超过标准量的15倍）。

THP-1细胞复苏

THP-1细胞复苏后通常需3-5天才能恢复状态。这种细胞对密度有一定依赖性，复苏时如去除冻存液，则建议在复苏后的48小时内不进行处理。低密度时，细胞易形成聚团，属于正常生长现象。同时，THP-1细胞的传代过程也较为简单。

传代方法

A、THP-1细胞为悬浮细胞，需根据实际情况定期传代，当密度达到8×10⁵个活细胞/mL时应进行传代，且不要超过1×10⁶活细胞/mL。
B、传代比例一般为1:2-4，可以在分瓶后补充培养液，无需离心。
C、若对悬浮细胞的密度把控不佳，建议通过细胞计数来辅助决定。
D、可每周离心一次，以去除死细胞。

细胞冻存

A、采用10%DMSO的冻存液：900μl FBS + 100μl DMSO（处理时需小心）。
B、收集生长状态良好的细胞，调整浓度至约200万-300万/mL进行冻存。
C、根据情况，将细胞放入-80℃培养箱，最多可放置3个月，尽快转移至液氮中长期保存。

常见问题

1、如果THP-1细胞在培养过程中出现聚团，该怎么办？少量聚团通常属于正常现象，特别是在细胞密度较低时。高密度时，细胞会自然分散。如果聚团严重，可通过调整细胞的处理条件来改善。
2、若THP-1细胞发生贴壁，应该如何处理？少量贴壁是正常的，可以通过轻轻吹打来收集细胞，或丢弃贴壁部分。但若贴壁细胞比例高于20%，则需检查培养箱环境及培养基成分。
3、THP-1细胞复苏不成功怎么办？请确保冻存时细胞量充足，并控制细胞复苏密度。复苏后需保持良好的培养条件，避免对细胞造成损伤。

不朽情缘MG致力于为科研提供优质细胞资源，确保用户在细胞培养过程中获得最佳效果。